尺寸排阻色谱法（SEC）是在非变性条件下分析蛋白质、单克隆抗体，包括：片段、单体及聚集体的公认方法。数十年来，TSKgel SW 系列色谱柱一直是业内生物治疗药物SEC分析的主力产品。TSKgel UP-SW3000-LS 色谱柱是这一著名色谱柱系列中的新成员。
TSKgel UP-SW3000-LS 色谱柱分辨率高、峰形锐利，开发的方法高效、稳健、重现性强，且易于在 UHPLC和HPLC系统方法间转移。在与高级检测器联用时，该UHPLC色谱柱可显著降低噪音水平、缩短平衡时间及提高数据质量。
TSKgel UP-SW3000-LS | |
分离原理 | 尺寸排阻（SEC） |
基材 | 二醇基键合硅胶 |
粒径 | 2μm |
孔径 | 250Å |
色谱柱材质 | 不锈钢 |
色谱柱尺寸 | 4.6×300mm和4.6×150mm，有配套保护柱 |
分离范围 | 10kDa~500kDa（下图2） |
应用范围 | 生物治疗药物的MALS和MS分析（下图1） |
图1 TSKgel UP-SW3000-LS 色谱柱与高级检测器 SEC 联用分析
图2 TSKgel UP-SW3000-LS 的校准曲线
近来，单克隆抗体衍生的双特异性或多特异性生物分子受到越来越多的关注。由于低分子量杂质和高分子量杂质的增加，使这些生物分子可能变得更加复杂。因此，需要更高级的检测方法，如：MALS或质谱法来表征这些复杂的样品。TSKgel UP-SW3000-LS 色谱柱正是为与高级检测器联用分析而设计的UHPLC色谱柱。针对多角度光散射（MALS）应用时，低噪音水平意味着高信噪比和检测灵敏度提升。针对质谱应用时，低柱流失可增加电喷雾离子化效率，增强整体MS的性能和设备正常运行时间。
TSKgel UP-SW3000-LS 如何在 MALS和MS应用中实现低噪音
TSKgel UP-SW3000-LS 色谱柱的主要特点是噪音更低，如图3A 所示。LenS3多角度光散射检测器采集的小角度信号数据显示该色谱柱柱流失水平非常低。
为了便于比较，将流动相进样到三种不同的色谱柱，TSKgel UP-SW3000-LS 色谱柱（图 3A）、竞品光散射专用色谱柱（图3B）和生物制药分析用 UHPLC 色谱柱（非Tosoh产品，图3C）。结果表明，TSKgel UP-SW3000-LS色谱柱尖峰最少、噪音水平最低。
图3 MALS应用下HPLC和UHPLC色谱柱的比较
图 4 所示为质谱应用时柱流失情况。图中显示的平衡期间和进样流动相后的累积强度 代表柱流失情况。TSKgel UP SW3000-LS柱“流失” 信号最低，结果取自20分钟一次的平衡周期。
图4 ESI-MS 应用下HPLC和UHPLC色谱柱的比较
批间重复性和柱寿命
如图5所示，TSKgel UP-SW3000-LS色谱柱不仅能够同时兼容MALS和MS检测，而且批间重复性高。如表1所示，柱寿命>500次进样（测试期间歇性停泵）进一步证实了这一点。这些特点使该色谱柱成为复杂生物治疗分子高效、可靠分析的选择。
图5 TSKgel UP-SW3000-LS 的批间重复性
进样 | 洗脱时间（min） | 洗脱时间变化（%） | 理论塔板数（%） | TP变化（%） |
1 | 12.464 | 100.0 | 55748 | 100.0 |
101 | 12.448 | 99.9 | 56343 | 101.1 |
201 | 12.455 | 99.9 | 56064 | 100.6 |
301 | 12.460 | 100.0 | 56055 | 100.6 |
401 | 12.443 | 99.8 | 55792 | 100.1 |
500 | 12.443 | 99.8 | 55792 | 100.1 |
表1 色谱柱寿命
上表是单根TSKgel UP-SW3000-LS色谱柱上重复进样抗体，进样100次后，停泵6小时。继续进样抗体前，采用对氨基苯甲酸作为样品来测试色谱柱柱效（洗脱时间和理论塔板数）。
订购信息
货号 | 描述 |
023546 | TSKgel UP-SW3000-LS 2μm 4.6×300mm |
023547 | TSKgel UP-SW3000-LS 2μm 4.6×150mm |
023548 | TSKgel guardcolumn UP-SW-LS 4.6×20mm |
023549 | TSKgel guardcolumn UP-SW-LS DC 4.6×20mm |
