第十九期 TSK-GEL Alpha系列色谱柱

2015年02月11日source:管理员
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TSK-GEL Alpha 系列色谱柱既可用于凝胶过滤色谱也可用于凝胶渗透色谱,能够用来分析水溶性和脂溶性多聚物。


特点:

独特的亲水性,聚乙烯树脂为基材

机械稳定性强, 溶胀小

广泛的溶剂使用范围:100%水-100%非极性溶剂

TSK-GEL SuperAW 系列色谱柱和 Alpha 系列色谱柱具有相似的化学结构,粒径和柱尺寸更小,

缩短分析时间,减少溶剂消耗,是高通量分析的首选。

以二甲基甲酰胺为流动相,可以精确确定样品的分子量。 其保留行为与聚苯乙烯相似。



色谱柱的清洗

要定期清洗色谱柱,清洗的频次取决于样品的纯度。使用过程中,偶尔有一些样品是会吸附于柱内填充物上的,如果您正在使用的色谱柱,其某个性能指标(如:不对称因子、保留时间、理论塔板数或者分离度)发生 10%或更大的变化时,请一定要注意清洗您的色谱柱。

各种 TSK-GEL 色谱柱都附带了验收报告单和操作条件与规格说明书。验收报告单上给出了用于色谱柱性能验收的测试方法;操作条件和规格说明书中给出了色谱柱的使用说明。使用验收报告单中所列举的标准样品进行柱性能的测试,并计算样品中的某个组份或多个组分的不对称因子、理论塔板数和分离度。请留心样品的保留时间,因为其会成为今后进行对比的参照基准。


清洗所有类型的 TSK-GEL 液相色谱柱的基本原则

1.按照相反的流动方向进行色谱柱的清洗。

2.不要将色谱柱与检测器连接。3.流速选择为最大流速的一半,并切实进行柱压的监控。

4.如果您打算使用 pH 值较高或者较低的溶液进行柱清洗的话,一定要确认您所使用的色谱系统的其它部分(如:泵、泵的密封圈、进样器等等)是否适合。

5.使用至少 5 个色谱柱体积(5CV)的各种清洗溶液进行清洗,各个清洗步骤之间一定要使用 5 个柱体积的超纯水进行冲洗。

6.使用您正使用的实验方案中的 5 个柱体积的流动相进行柱子的平衡。

我们在操作条件和规格说明书中推荐了适合各种类型的 TSK-GEL 液相色谱柱使用的清洗溶液,您可以根据柱子和样品的种类选择。一般来说,低 pH 值的盐溶液能够清洗碱性蛋白;有机溶剂能够清洗疏水性蛋白;尿素、界面活性剂等能够清洗强吸附物质。


清洗溶液

SW&SWxl系列色谱柱

1.pH较低(如:pH3.0)、浓度较高的盐溶液(如:0.5MNa2SO4);2.添加水溶性有机物(MeOH、ACN、EtOH、10%-20%)的极性缓冲液;3.SDS(0.1%)、尿素(8M)或胍(6M)的缓冲溶液。注意:这些试剂很难被去除。它们需要使用 20-40 个柱体积的 20%ACN进行冲洗。因此,只有当先前的清洗方法无效时才选择使用本方法。


PW&PWxl 系列色谱柱

1.高盐极性缓冲液(如:0.5M-1.0MNa2SO4);

2.pH较低(如:2-3)或较高(如:11-12)的缓冲溶液;

3.添加水溶性有机物(MeOH、ACN、EtOH、10%-20%)的极性缓冲液;

4.SDS(0.1%)、尿素(8M)或胍(6M)的缓冲溶液。注意:这些试剂很难被去除。


SW 类离子交换系列色谱柱

1.高盐极性缓冲液(如:0.5M-1.0M Na2SO4);

2.较低pH值(如:2-3)的缓冲液;

3.添加水溶性有机物(MeOH、ACN、EtOH,10%-20%)的极性缓冲液;

4.添加尿素(8M)或非离子性表面活性剂的缓冲溶液。注意:这些试剂很难被去除。 


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