第一百零四期 糖类物质分离用硅胶填料----富士NH SG Silica Gel

2018年02月27日来源:管理员
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      糖类物质的分析和制备,在液相色谱领域占有重要的地位。迄今为止,大多数的分离介质仅仅局限在分析级别。但是富士硅胶研发出用于制备色谱的新的氨基硅胶。当使用高水相为流动相时,一般的氨基填料会暴露出很多问题。氨基硅胶的pH值很高,一般pH为9.0,在这样高的pH条件下,目标化合物一般都会变性,并且会毁坏硅胶基质的表面。考虑到这些问题,富士公司研发出新的氨基硅胶填料,称之为NH SG硅胶。NH SG硅胶可以最小化甚至是避免上述问题,并且对糖类化合物进行更好的分离。

物理特性                                                                                                                                                          

NH SG硅胶有3种级别的填料用于制备应用:

-- NH SMB 100-20/45SG     用于保护柱,HPLC色谱柱

-- NH MB 100-40/75SG      用于Flash柱,保护柱

-- NH MB 100-75/200SG     用于开放柱

下表列出了富士NH SG硅胶的一些物理特性。这些填料是键合在氨基硅胶上,并且pH中性。

 

 

NH  SMB 100-20/45SG

NH  MB 100-40/75SG

NH  MB 100-75/200SG

硅胶基质

 

 

 

比表面积 m2/g

300

300

300

孔容   ml/g

0.80

0.75

0.75

粒径 μm

30

60

110

NH  SG

 

 

 

堆积密度 g/ml

0.63

0.63

0.63

pH

7.5

7.5

7.5

 

中性化合物的分离

对于中性化合物,NH SG硅胶和富士的NH硅胶有着相似的分离色谱行为。



糖类物质的分离

众所周知,NH官能团会和酮或者羧基发生反应。但是,NH SG硅胶填料可以在有机相/水的流动相体积下分离大多数的糖类化合物,而不发生上述化学反应。NH SG硅胶在正相条件下使用,尤其是亲水相互作用模式(HILIC)。作为典型的HILIC模式,在增加水相比例的条件下,洗脱增强。以下的分离应用数据,使用的就是乙腈/水体系。

 

TLCHPLC的预实验

在使用NH MB 100-75/200SG填料之前最好做一下预实验。以下是使用NH 薄层板和NH2 SPS 100-5SG做的预实验。


溶剂条件

糖类的分离通常用到的是乙腈/水做流动相。当乙腈的含量增加,保留因子k’增加。但是乙腈的含量需要仔细的控制,因为随着乙腈含量的增加,样品的溶解性会变差。




   应 用   

1. 单糖和二糖的分离 


2. 寡糖的分离



2-1 寡糖的制备


3. 环糊精的分离




3-1 环糊精的制备



3-2 Fraction A的分析




3-3 Fraction B的分析 


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